HiPSC : culture, édition du génome, contrôles qualité et différenciations Présentiel

AXE 11 - Biologie cellulaire et microbiologie

Environnement scientifique et technique de la formation

Institut NeuroMyoGène
https://inmg.fr/

RESPONSABLE
Arnaud JACQUIER
Chercheur
UMR 5261

Culture cellulaire

hiPSC : culture, édition du génome, contrôles qualités et différenciations

PROGRAMME

Cours interactifs (10 h)

• Bonnes pratiques de laboratoire (BPL) concernant la culture des cellules humaines
• La reprogrammation en cellules souches hiPSC
• Applications potentielles de la culture des hiPSC
• Modifications géniques des hiPSC : avantages et inconvénients des différentes méthodes de transfection et anatomie fine de l'édition génomique par CRISPR/Cas9
• Méthodes de culture des hiPSC
• Contrôle qualité des hiPSC et traçabilité

Manipulations au laboratoire (12 h)

• Observation au microscope des hiPSC aux différents stades de culture
• Les différentes méthodes de passage des cellules, comptage, viabilité, congélation et décongélation
• Préparation des échantillons pour le contrôle qualité
• Clonage des cellules
• Transfection des hiPSC et modification du génome par CRISPR/cas9
• Différenciation des hiPSC en neurones

Chaque stagiaire manipulera des cellules hiPSC en culture (passage, congélation, préparation des échantillons cellulaires pour les contrôles qualités).

EQUIPEMENT
Laboratoire en confinement L2 équipé, PSM, incubateurs, microscope, centrifugeuse, réfrigérateur-congélateur, congélateur -80°, cryo-conservateur, compteur de cellules et loupe avec caméra pour le repiquage (Makrolite)

INTERVENANTS
A. Jacquier, L. Coudert (chercheurs), M. Weiss, V. Risson, A. Hennick et J. Carras (ingénieurs)

• Maîtriser la pratique de la culture des hiPSC (human induced Pluripotent Stem Cells)
• Mettre en œuvre le contrôle qualité des hiPSC
• Être capable de modifier le génome par CRISPR/Cas9
• Savoir différencier des hiPSC en neurones

Alternance de cours interactifs (les matins) et de manipulations au laboratoire (les après-midis).

Tout au long de la formation, des exercices corrigés permettront au stagiaire d'évaluer son acquisition des connaissances.

Des fichiers au format PDF seront mis à disposition du stagiaire.

Evaluation de la formation par les stagiaires.

Envoi d'une attestation de formation.